3、试管苗种质保存方法

保存试管苗种质关键是要维持最低的生长速度，生长速度取决于培养温度、培养基组成和品种特性.

(1) 增加培养基渗透压

（2）降低保存温度：温度是试管苗保存的关键因素，在低温(3～5℃)条件下，试管苗中各种酶活性降低，因而减缓了代谢过程和生长速度。如果增加培养基渗透压与降低温度相结合，试管苗继代培养间隔时间为2～3年

（3）利用植物生长抑制

（4）补充光照

目前，作为保存种质资源的细胞或组织培养物有：愈伤组织、悬浮细胞、幼芽生长点、花药、花粉、体细胞、原生质体、幼胚等。

从植物中抽取大分子量DNA，用限制性核酸内切酶把所抽取的DNA切成许多片段，再通过一系列的复杂步骤，把这些DNA连接在载体上，通过载体将DNA片段转移到大肠杆菌中去，通过大肠杆菌的无性繁殖，产生大量单拷贝的基因，当需要某个基因时，就可通过某种方法去“钩取”获得。

2、植物DNA库的保存对象与运作

（1）保存对象：种子植物和非种子植物的种质资源均可采用DNA库保存。

种子植物主要保存以下几类基因材料：a.难于搜集到的材料，b 虽然搜集到种子，但难以繁殖更新的材料，c.不能检测种子活力的材料，d.顽拗型种子植物，e.珍稀濒危植物，f.核心样品材料，g.基因工程的中间材料。

非种子植物主要包括藻类、苔藓类和蕨类等，这些植物绝大部分处于野生状态，而且包含着十分丰富的遗传多样性，急需得到保护。

（2）植物DNA库的运作：第一步：制定计划，进行植物样本的采集，并制作蜡叶标本，记录原始标记。第二步：妥善保存所搜集的材料，根据需要和条件提取并保存基因组DNA，克隆重要的基因，建立DNA或cDNA库。第三步：根据用户的需要，在用户提供引物的基础上，钩取基因，并用PCR扩增DNA，发放给用户。

，（2）分组：将具有相似性状的样品归为一类， 逐级分类，没有资料的样品单独分组。

（3）选择：即确定每组选择的数量和对象

（4）建立核心样本（库）：对选择出来的核心样品进行鉴定，确保它们是来自不同组的代表，繁殖核心样品，建立该种作物核心种质库。

建成的核心种质库需不断完善、更新

4、发展核心种质应注意的几个问题

（1）核心种质不能替代整个种质搜集品。

（2）核心种质的构建需要多学科的交叉知识。

（3）核心种质的构建还没有一套成型的理论。

5、核心种质构建的现状：

目前全球已对50多种作物进行了相关研究，其中野生大豆、花生、苜蓿等30多种植物已经或正在建立核心种质 。我国对大豆、栽培稻立项

生物学特性的鉴定方法主要分两种

1、自然环境鉴定

二、生物学特性鉴定

1、自然环境鉴定

（1）区域鉴定 ：利用不同地区的地理条件、土壤条件以及温度、光照、雨量等气候因素的差异，栽培植物种质材料，观察其生育状况，以鉴别种质材料在不同地区的适应性，以及不同品种、变种和种间生物学特性的差别。

（2）季节鉴定：鉴定种质材料对季节的适应性。如分春秋两季栽培，鉴定种质对不同季节的适应性。

同一种作物，有的品种适宜春季栽培，有的适宜秋季栽培。

鉴别种质材料的季节适应性，才能进行合理利用，充分发挥其生产潜力。

2、人工控制环境下的鉴定

在大棚、温室、人工气候室或人工气候箱中，通过人工控制环境条件，即人工促成类似季节变化的小气候变化，栽培植物种质材料，鉴别种质材料对单个因子或复合环境因子的最适范围，以及所能忍耐的极限。

人工控制环境的鉴定优点：

人工控制环境条件，各环境因子完全在人工控制下发生，可以比较准确的鉴定植物不同种、类型及品种间对春化温度的感应和所需时间的差异，对光强和光周期的适应性。