- PCR扩增：以含目的基因DNA为模板，设计引物，在Taq酶作用下，经变性、复性、延伸循环，大量扩增目的基因。

- 人工合成：已知目的基因序列，用DNA合成仪直接合成。

2. 构建基因表达载体

- 用相同限制酶切割目的基因和载体，如质粒，使其产生相同黏性末端。

- 用DNA连接酶将目的基因与载体连接，形成重组DNA分子。

3. 导入受体细胞

- 植物细胞：常用农杆菌转化法，利用农杆菌Ti质粒将目的基因整合到植物染色体。

- 动物细胞：常用显微注射法，借助显微操作仪将重组DNA注入受精卵。

- 微生物细胞：用Ca2?处理细胞成感受态，使其吸收重组DNA。

4. 目的基因的检测与鉴定

- 分子水平检测：DNA分子杂交看目的基因是否插入；核酸分子杂交检测转录；抗原 - 抗体杂交检测翻译。

- 个体生物学水平鉴定：对转基因生物做抗虫、抗病接种实验，观察性状。污染物。